MTT的替代产品

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MTT的替代产品

2023-12-06 08:09| 来源: 网络整理| 查看: 265

WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高 4 、 CCK-8 法或称 WST-8 法

CCK-8 试剂中含有 WST–8 :化学名: 2- ( 2- 甲氧基 -4- 硝基苯基) -3- ( 4- 硝基苯基) -5- ( 2 , 4- 二磺酸苯) -2H- 四唑单钠盐,它在电子载体 1- 甲氧基 -5- 甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯( 1-Methoxy PMS )的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物( Formazan )。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在 450nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。

优点 :

1 、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;

2 、检测快速;

3 、灵敏度高,甚至可以测定较低细胞密度;

4 、重复性优于 MTT ;

5 、对细胞毒性小;

6 、为 1 瓶溶液,毋需预制,即开即用。

缺点:

1 、与 MTT 相比, CCK-8 和 XTT 的价格比较贵。

2 、 CCK-8 试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。



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